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Doctoral thesis
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The Wnt5aTet-ON 3G mouse model reveals new insights on the steroidogenic cell lineage

ContributorsAdemi, Herta
DirectorsNef, Sergeorcid
Defense date2020-08-03
Abstract

Les cellules de Leydig et les cellules de la thèque sont des cellules productrices d'hormones stéroïdiennes. Elles jouent un rôle majeur dans le développement humain et murin puisqu'elles sont responsables de la biosynthèse des androgènes. Elle sont présentes dans le compartiment interstitiel des testicules et des ovaires, respectivement. Les androgènes (ainsi que les œstrogènes) sont nécessaires à la production des gamètes et à la différenciation sexuelle des individus mâles et femelles. Malgré leur fonction endocrinienne cruciale, l'origine des cellules de Leydig et des cellules de la thèque reste inconnue. Comme ces deux types cellulaires sont mitotiquement inactifs, il est largement admis qu'ils proviennent d'un processus de différenciation des cellules progénitrices somatiques. Toutefois, ces progéniteurs n'ont pas encore été clairement identifiés ni caractérisés. Les cellules de Leydig apparaissent au cours du développement de l'embryon. Nous pouvons distinguer les Leydig fœtales, qui apparaissent autour de E125 et restent jusqu'à P0, et les Leydig adultes, qui apparaissent après la naissance. Selon les modèles actuels, de multiples sources ont été décrites pour les cellules de Leydig fœtales, dont l'épithélium cœlomique et les mésonéphros. En revanche, le progéniteur des Leydig adultes n'a pas encore été clairement identifié. Plus particulièrement, on ne sait pas encore s'il existe un seul précurseur qui génère les cellules de Leydig fœtales et adultes ou si deux précurseurs différents sont activés à des moments distincts du développement. Dans la présente étude, nous avons identifié Wnt5a comme marqueur spécifique des progéniteurs stéroïdogènes. Nous avons donc généré une lignée de souris transgéniques Wnt5a pour tracer des progéniteurs stéroïdogènes, in vivo, et caractériser leur devenir au cours du développement. Le modèle de souris Wnt5aTet-On 3G; TetOCre; R26tdTomato a été utilisé pour le marquage permanent des progéniteurs exprimant Wnt5a. Ce système est composé de trois éléments : le transgène Tet-On 3G inséré dans le Wnt5A 5'-UTR (spécifiquement généré pour ce projet), la CRE répondant au promoteur Tet-On et la protéine fluorescente Tomato. Le marquage Tomato (rouge) se produit lors de l'administration de doxycycline dans l'eau de boisson des femelles enceintes ou des descendants adultes. Grâce à cet outil, nous avons constaté que 50 % des Leydig fœtales et 70 % des Leydig adultes proviennent du même pool de progéniteurs présents dans le testicule au jour 11.5 de l'embryon. De plus, nous avons découvert une deuxième population de progéniteurs Wnt5a qui apparaît dans le testicule cinq jours après la naissance et qui génère une deuxième vague de Leydig adultes. Étonnamment, à l'âge adulte, nous avons également observé un sous-ensemble de Leydig adultes exprimant Wnt5a et qui est encore capable de proliférer à un rythme lent.

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Citation (ISO format)
ADEMI, Herta. The Wnt5aTet-ON 3G mouse model reveals new insights on the steroidogenic cell lineage. 2020. doi: 10.13097/archive-ouverte/unige:142592
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Thesis
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Technical informations

Creation09/29/2020 12:03:00 PM
First validation09/29/2020 12:03:00 PM
Update time04/11/2023 1:24:11 PM
Status update04/11/2023 1:24:11 PM
Last indexation05/05/2024 5:17:13 PM
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