Dictyostelium discoideum, est une amibe sociale qui est utilisée pour l'étude de la phagocytose, phénomène d'internalisation de bactéries et autres particules. Le processus complexe de phagocytose englobe la maturation du phagosome ainsi formé, qui comporte une phase d'acidification et de digestion protéolytique. Dictyostelium constitue un excellent modèle car ces processus sont bien conservés au cours de l'évolution, et se retrouvent dans les cellules des systèmes immunitaires des organismes supérieurs. Afin de mieux comprendre la dynamique de la phagocytose in vivo, c'est-à-dire l'évolution du pH en fonction du temps, nous avons utilisés un spectrofluorimètre à grande capacité, capable de mesurer la fluorescence dans une plaque multipuits contenant les différentes souches d'amibes à étudier. Dans un premier temps, nous avons défini un protocole incluant tous les paramètres expérimentaux, tels que la densité des amibes dans chaque puits, les fluorochromes utilisés selon les mesures à effectuer, la température d'incubation, la sensibilité de la machine utilisée, etc… L'application de ce protocole à différentes souches de Dictyostelium nous a permis de comparer la capacité d'acidification de la souche sauvage Ax2 et d'autres souches mutantes, tel que wash-, carmil-, et d'autres encore. Pour Ax2, un pH de 4.2 est atteint 40 minutes après le début de la phagocytose. Nous avons également mis en évidence le défaut de reneutralisation dans la souche wash-, où le pH obtenu est de 5.5 mais ce dernier ne remonte pas durant la maturation du phagosome. Ces résultats sont proches des différentes études de l'acidification chez Dictyostelium, mais ce travail apporte un avantage considérable par rapport aux autres méthodes de mesures : la répétabilité. En effet, les paramètres sont définis à l'avance, et peuvent être sauvegardé, cela représente un gain de temps certain. De plus, il est possible de faire simultanément les mesures sur plusieurs souches différentes et de pouvoir superposer les résultats obtenus. Il est également aisé de changer les paramètres pour adapter l'expérience en fonction du processus biologique étudié. Nous avons appliqué une stratégie expérimentale similaire pour l'étude de l'activité protéolytique phagosomale des différentes souches d'amibes. La superposition des résultats de l'activité protéolytique avec l'acidification, laisse suggérer une corrélation entre ces deux processus biologique.