Imagerie multiphotonique : exploration des techniques sur des neurosphères humaines in vitro et étude des dommages non-linéaires sur des poumons frais de souris ex vivo

Diplôme Master Imagerie multiphotonique : exploration des techniques sur des neurosphères humaines in vitro et étude des dommages non-linéaires sur des poumons frais de souris ex vivo fre 2026-07-09 2026-07-02 author Brocher Louis Paul Adrien Oscar 963672 director Bonacina Luigi 0000-0003-0476-4473 632447 Serv com physique appliquée (FIGCO) director Sivakumar Shaginth 953674 52 La microscopie multiphotonique permet d’obtenir une imagerie d’échantillons tridimensionnels. Grâce à la génération d’harmoniques, notamment la deuxième (SHG) et la troisième (THG), l’utilisation de fluorophores n’est plus toujours indispensable. Cependant, malgré les progrès récents de cette technologie, l’imagerie de certaines structures biologiques, telles que les organoïdes, demeure encore peu explorée. Par ailleurs, la compréhension des dommages induits par l’irradiation laser, est indispensable pour définir des conditions d’acquisition garantissant une imagerie préservant l’intégrité des échantillons. Dans ce travail, le microscope à multiphotons est appliquée à des neurosphères humaines, formées de neurones et d’astrocytes in vitro afin de les visualiser dans leur intégralité. En effet, la THG met particulièrement en évidence les tissus nécrosés ainsi que les noyaux des cellules du tissu neural. Par ailleurs, un algorithme de détection et de quantification automatique des noyaux est développé. Bien que des améliorations restent nécessaires pour accroître sa fiabilité, la densité cellulaire peut être estimée. Cependant, cette technologie peut endommager les cellules. Pour cette raison, dans cette étude, des expériences sur des poumons frais de souris sont effectuées afin de mieux comprendre les différents types de dommages induits et de déterminer les paramètres d’acquisition permettant de les éviter. Les seuils de dommages sont mesurés à 1300nm et 1650nm correspondant respectivement aux minima d’absorption de la deuxième et la troisième fenêtres du proche infrarouge (NIR II, III ). Les modifications sur le photoblanchiment de l’autofluorescence du tissu pulmonaire murin sont aussi évaluées. Enfin, un approfondissement des techniques de segmentation pour des images multispectrales permet l’identification de structures biologiques. Dewey 500.2 35 Groupe de physique appliquée 135 false 1414 Groupe Bonacina 8182990d-fdea-4d89-9441-dd1287d88988 Master thesis Restricted Travail_de_master_Louis_Brocher.pdf 78902396 application/pdf 6ff11c25c5ab56167d0907b725049f562e1fc77ff6edc26143b7ffca57d71a5e restrictedAccess Faculté des sciences / Section de physique / Groupe de physique appliquée

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Imagerie multiphotonique : exploration des techniques sur des neurosphères humaines in vitro et étude des dommages non-linéaires sur des poumons frais de souris ex vivo				2026	11	0

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