Ce travail présente une étude effectuée sur la conservation d'hépatocytes par cryopréservation. Les pertes cellulaires associées aux techniques actuelles sont extrêmement élevées, d'où l'idée d'utiliser une technique de culture cellulaire tridimensionnelle qui permet une récupération structurelle et fonctionnelle des cellules isolées, donc une meilleure résistance à un cycle de cryopréservation. Des procédures d'isolement, de purification et de culture cellulaire en trois dimensions ont été acquises. Des évaluations structurelles et métaboliques montrent que nos hépatocytes sont fonctionnels. Ces résultats sont très satisfaisants, et ont d'autres applications potentielles, comme par exemple les thérapies cellulaires ou géniques. Sur la base d'une revue approfondie de la littérature médicale et physique sur les problèmes rencontrés lors des cycles de refroidissement et de réchauffement, des protocoles de cryopréservation en suspension puis en cultures tridimensionnelles ont été élaborés. Les résultats obtenus sont insatisfaisants, avec un taux de destruction des cultures prohibitif, lié principalement au réchauffement des cultures.