Master
English

Heat shock response in the freshwater Hydra polyp: Hsp70.1 genes and inducible activity of the Hsp70.1a promoter

Master program titleMaster in Biology, option Genetics, Development and Evolution
Defense date2019
Abstract

L'hydre est un polype d'eau douce à symétrie radiaire appartenant au phylum des Cnidaires. Elle est constituée de deux couches cellulaires et trois types de cellules souches dotées d'une capacité d'auto-renouvèlement indéfini, ce qui la rend immortelle. Depuis 2006, la production d'hydres transgéniques stables est possible mais des promoteurs endogènes inductibles n'ont pas été identifiés. Le but de cette étude est d'identifier un promoteur inductible qui permettrait de diriger l'expression transitoire de gènes placés en aval. Dans ce but, nous nous sommes concentrés sur le gène Hsp70.1 hautement conservé chez les métazoaires et responsable du maintien de l'équilibre homéostatique et de la viabilité de la cellule. Alors que ce gène Hsp70.1 a été décrit comme existant sous forme d'une seule copie, nous avons trouvé que ce gène est en fait présent sous forme d'au moins trois copies chez deux espèces d'hydre, H. oligactis et H. vulgaris. Nous avons aussi localisé une série d'éléments consensus sensibles au choc thermique dans les séquences promotrices des gènes Hsp70.1. En comparant l'inductibilité de l'expression de ces trois gènes Hsp70.1 par choc thermique dans deux souches de H. vulgaris, Hm-105 et AEP. Deux de ces gènes, Hsp70.1a et Hsp70.1b, sont induits suite à un choc thermique tandis que le troisième Hsp70.1c montre un niveau d'expression stable. Ces expériences nous ont permis d'établir les conditions optimales qui permettent une réponse transcriptionnelle maximale au choc thermique sans induire la mort des animaux. Nous avons produit une série de constructions rapportrices exprimant la protéine GFP sous le contrôle du promoteur Hsp70.1a. Afin de valider l'inductibilité de ces constructions, différents tests ont été conduits dans des cellules humaines transfectées et chez l'Hydre après électroporation. Nous avons aussi produit une lignée transgénique stable exprimant la construction Hsp70.1a_0.5kb::GFP chez l'Hydre AEP. Cependant nous n'avons obtenu aucune évidence de l'inductibilité de ces séquences promotrices suggérant que les séquences régulatrices des gènes Hsp70.1 bien que sensibles aux chocs thermiques ont un fonctionnement plus complexe qu'anticipé pour diriger de façon inductible l'expression de gènes d'intérêt chez l'Hydre.

Research groups
Citation (ISO format)
BOUKERCH AKROUR, Salima. Heat shock response in the freshwater Hydra polyp: Hsp70.1 genes and inducible activity of the Hsp70.1a promoter. Master, 2019.
Main files (1)
Master thesis
accessLevelRestricted
Identifiers
  • PID : unige:121009
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Technical informations

Creation12/07/2019 22:18:00
First validation12/07/2019 22:18:00
Update time15/03/2023 17:48:03
Status update15/03/2023 17:48:03
Last indexation31/10/2024 13:53:08
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