Insights into the role of EGFR in the modulation of fibronectin in the cystic fibrosis airway epitheluim

Diplôme Master Insights into the role of EGFR in the modulation of fibronectin in the cystic fibrosis airway epitheluim eng 2022-07-15 2022-07-15 author Bou Younes Marie-Therese A 938750 director Chanson Marc 0000-0001-8104-2090 32865 La mucoviscidose (OMIM 219700) est une maladie autosomique récessive due à des mutations du gène régulateur de conductance transmembranaire de la mucoviscidose (CFTR). L’épithélium respiratoire mucoviscidosique est caractérisé par une aberrante expression de la fibronectine déposée sur sa surface apicale. Cela crée un environnement favorable pour l’attachement et la prolifération de la bactérie Pseudomonas aeruginosa et mène à des infections récurrentes et à l’inflammation. L’expression de la fibronectine est fortement régulée par des voies de signalisation. Dans ce travail, nous cherchons à comprendre si la mutation du CFTR conduit à une dérégulation dans la voie de signalisation du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) et si cette voie contribue à l’expression ectopique de la fibronectine dans l’épithélium respiratoire mucoviscidosique. Dans des cellules épithéliales des voies aériennes cultivées en monocouche, nous montrons que la signalisation de l’EGFR n’est pas dérégulée. Cependant, l’inhibition de l’EGFR ou de son effecteur en aval, AKT, entraîne une diminution de la fibronectine uniquement dans les cellules pour lesquelles le gène CFTR a été inactivé (CFTR knockdown, CFTR-KD). Cette observation suggère une communication complexe entre la voix de signalisation de l’EGFR et l’expression de la fibronectine dans les cellules CFTR-KD en monocouche. En contrepartie, lorsque ces cellules sont cultivées sur des inserts poreux à l’interface air-liquide, le taux de prolifération diminue et leur différentiation est initiée afin de former un épithélium respiratoire polarisé (reflétant les conditions natives). Dans ce modèle, l’expression de l’EGFR est fortement diminuée, le signal étant localisé au niveau intracellulaire. La différence observée entre les cellules en monocouche et les cellules polarisées suggère que l’EGFR contribue à l’expression apicale de fibronectine en absence de CFTR lors de la différenciation de l’épithélium respiratoire. Le processus de différenciation intervient dans les mécanismes de renouvellement et de réparation après blessure de l’épithélium respiratoire. Cystic Fibrosis (OMIM 219700) is an autosomal recessive disease due to mutations in the Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator (CFTR) gene. The Cystic Fibrosis respiratory epithelium displays an aberrant expression of fibronectin with an ectopic apical localization. It creates a favorable environment for Pseudomonas aeruginosa attachment and proliferation leading to recurrent infections and inflammation. The expression of fibronectin is highly regulated by signaling pathways. In this work, we aim to understand whether the mutation in CFTR leads to a dysregulation in the epidermal growth factor receptor (EGFR) pathway and whether this pathway contributes to the ectopic expression of fibronectin in Cystic Fibrosis. On monolayers of airway epithelial cells, we show that EGFR signaling is not dysregulated. However, silencing EGFR or its downstream effector AKT leads to a downregulation of fibronectin only in CFTR knockdown (CFTR-KD) cells. In the CFTR-KD polarized epithelium, however EGFR is downregulated and mis-localized. Taken together, our data show there is a complex crosstalk between EGFR signaling and the expression of fibronectin in CFTR-KD monolayers. The role that EGFR and its effector play in a polarized epithelium is yet to be determined. The difference observed between monolayers and polarized cells accentuate the importance of choosing the most suitable cellular model that mimics the conditions in the human body. Dewey 612 Dewey 570 46 Département de biologie cellulaire 165 134 Département de physiologie cellulaire et métabolisme 21C false 180 Mucoviscidose et jonctions communicantes 229 bf28d946-741c-4dd8-9969-3d33bf19a932 Master thesis Restricted Master thesis-Marie-Therese A. Bou .pdf 3143629 application/pdf restrictedAccess Faculté des sciences / Section de biologie / Département de biologie cellulaire Faculté de médecine / Section de médecine fondamentale / Département de physiologie cellulaire et métabolisme

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Insights into the role of EGFR in the modulation of fibronectin in the cystic fibrosis airway epitheluim				2022	92	2

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Bou Younes, Marie-Therese A

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