Cette thèse décrit le développement de réacteurs enzymatiques et leur application dans le domaine de la bioanalyse. Deux enzymes ont été particulièrement étudiées : la trypsine, utilisée aujourd'hui au laboratoire pour la digestion de protéines en peptides, et la superfamille des cytochromes P450 (CYP450), largement impliquée dans le métabolisme de médicaments. L'objectif de ce travail a été de développer des nouvelles stratégies analytiques automatisées comme alternative aux essais in vitro conventionnels impliquant ces deux enzymes. Deux stratégies ont été investiguées : (1) l'immobilisation sur des supports chromatographiques et (2) l'utilisation d'un capillaire de silice en tant que micro-bioréacteur afin de réduire les volumes d'incubation et la quantité de réactifs nécessaires aux essais enzymatiques. L'approche d'immobilisation a été appliquée à la fois à la trypsine et aux CYP450, tandis que le micro-bioréacteur a été élaboré principalement pour les essais avec les CYP450.